高三生物如何掌握這些重要實驗？

　　實驗一：觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布

　　1.實驗原理：利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布；甲基綠和吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同：甲基綠+DNA→綠色

　　吡羅紅+RNA→紅色

　　2.分布：真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中；

　　線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA；RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。

　　3.實驗結(jié)果：細(xì)胞核呈綠色，細(xì)胞質(zhì)呈紅色.

　　4.實驗結(jié)論：DNA主要分布在細(xì)胞核中；RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中；

　　5.實驗流程：

　　(1)取口腔上皮細(xì)胞制片：①載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為：0.9%NaCl溶液；

　�、谑�口后，用消毒牙簽刮口腔內(nèi)壁后放在載玻片的液滴中涂抹幾下；③載玻片在酒精燈上烘干，蓋上；

　　(2)水解：①載玻片放入盛有30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的HCl的小燒杯中；②大燒杯中加入30℃溫水；

　�、蹖⑿�燒杯放入大燒杯中保溫5min；

　　(3)沖洗涂片：用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s；

　　(4)染色：①吸水紙吸去載玻片的水分；②滴兩滴混合染液，染色5min；③吸去多余的染液，蓋上蓋玻片；

　　(5)觀察：先低倍后高倍；

　　6、幾種液體在實驗中的作用：

　　(1)0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形態(tài)。

　　8%的HCl：①改變細(xì)胞膜等的通透性；②使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分開。蒸餾水：配置染液；沖洗載玻片。

　　(2)混合染液需要現(xiàn)配現(xiàn)用；

　　(3)該實驗不宜用深色的材料，避免顏色對實驗的干擾。

　　實驗二：物質(zhì)鑒定

　　一、實驗原理：還原糖+斐林試劑～磚紅色沉淀(水浴加熱)

　　脂肪+蘇丹III～橘黃色(滴液觀察或制片顯微鏡觀察)

　　脂肪+蘇丹IV～紅色

　　蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑～紫色反應(yīng)(不加熱)

　　1、還原糖的檢測

　　(1)材料的選�。哼�原糖含量高，白色或近于白色，如：蘋果，梨，白蘿卜。

　　(2)試劑：斐林試劑(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，現(xiàn)配現(xiàn)用。

　　(3)步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴

　　加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍(lán)色→磚紅色)

　　實驗三：觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動

　　1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細(xì)胞臨時裝片

　　2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色，球形或橢球形。

　　用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色，細(xì)胞質(zhì)接近無色。

　　知識概要：取材、制片、低倍觀察、高倍觀察

　　實驗四：觀察有絲分裂

　　1、材料：洋蔥根尖(蔥，蒜)

　　2、步驟：(一)洋蔥根尖的培養(yǎng)

　　(二)裝片的制作

　　3、實驗原理：

　　(1)龍膽紫溶液能將染色體染成深色

　　(2)有絲分裂各個時期細(xì)胞內(nèi)染色體的形態(tài)和行為變化不同，可用高倍顯微鏡根據(jù)各個時期內(nèi)染色體的變化情況，識別該細(xì)胞處于那個時期。

　　制作流程：解離→漂洗→染色→制片

　　1.解離：藥液：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸，體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1：1混合液).時間：3~5min.目的：使組織中的細(xì)胞相互分離開來.

　　2.漂洗：用清水漂洗約10min.目的：洗去藥液，防止解離過度，并有利于染色.

　　3.染色：用質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min

　　目的：使染色體著色，利于觀察.

　　4.制片：將根尖放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子把根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.

　　目的：使細(xì)胞分散開來，有利于觀察.

　　(三)觀察

　　1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞正在分裂。(長方形：伸長區(qū))

　　2、換高倍鏡下觀察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點)。其中，處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。

　　實驗五：色素的提取和分離

　　1、原理：(1)葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素(2)各色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素

　　2、步驟：

　　提取色素

　　(1)稱取5g綠色葉片并剪碎提取色素

　　(2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮

　　(研缽→研磨→漏斗過濾→，收集到試管內(nèi)并塞緊管口)

　　制濾紙條

　　(1)將干燥的濾紙剪成6cm長，1cm寬的紙條，剪去一端兩角(使層析液同時到達(dá)濾液細(xì)線)

　　(2)在距剪角一端1cm處用鉛筆畫線

　　濾液劃線

　　(1)用毛細(xì)管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細(xì)線

　　(2)干燥后重復(fù)劃2-3次

　　紙上層析

　　(1)向燒杯中倒入3ml層析液(以層析液不沒及濾液細(xì)線為準(zhǔn))

　　(2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內(nèi)壁，輕輕插入層析液中

　　(3)用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯

　　觀察結(jié)果：濾紙條上出現(xiàn)四條寬度、顏色不同的彩帶。